液相色譜峰的保留時間不重現(xiàn)分為兩種情況：一是保留時間單方向的漂移，即保留時間提前或延后；二是保留時間無規(guī)律的波動，即保留時間忽前忽后。保留時間漂移的原因大概率是不同機理的色譜柱老化，如固定相流失（例如通過水解），色譜柱污染（由樣品或流動相所致）等。下面來逐一分析主要的影響因素及如何改善。
1、色譜柱平衡不夠。
若發(fā)生保留時間漂移，需要考慮流動相是否已使色譜柱達到充分的平衡。一般情況下，流動相平衡色譜柱需要10-20個柱體積；但如果流動相中有使用弱酸、弱堿、緩沖鹽和離子對試劑，或者固定相為正相硅膠等，則需要更長的時間來平衡色譜柱。
2、色譜柱污染或受損。
這時也可能會導致保留時間的漂移，需要同時觀察色譜峰型、柱效、壓力的變化情況，推測色譜柱是否被污染。可以根據(jù)具體的測試條件來選擇適當?shù)娜軇┻M行色譜柱的沖洗，或更換新的色譜柱。為了延長色譜柱的使用壽命，增加保護柱是非常有效的方法。
3、柱溫改變。
確認柱溫的準確性，柱溫的變化也會導致保留時間的變化。
4、流動相改變。
流動相中某種試劑的揮發(fā)，流動相中不同試劑的比例配制有誤，也會導致保留時間的變化，需要確認流動相是否新鮮與正確。
5、流速改變。
觀察柱前壓力，如果壓力不穩(wěn)定或者偏離正常值，可能是泵流速不準確或者有氣泡產生，出現(xiàn)保留時間的不穩(wěn)定，需要保證儀器流速的準確性與穩(wěn)定性。
6、疏水坍塌。
當小孔徑和端基封口良好的反相色譜柱使用接近100%的水為流動相時，有時會發(fā)生分離突然喪失、樣品保留明顯降低或完全不保留，此現(xiàn)象稱為疏水坍塌。
液相色譜峰的保留時間不重現(xiàn)的原因分析及改善方法
（一）保留時間變化
①柱溫變化--柱恒溫
②等度與梯度間未能充分平衡--至少用10倍柱體積的流動相平衡柱
③緩沖液容量不夠--用>25mmol/L的緩沖液
④柱污染--每天沖洗柱
⑤柱內條件變化--穩(wěn)定進樣條件,調節(jié)流動相
⑥柱快達到壽命--采用保護柱
（二）保留時間縮短
①流速增加--檢查泵,重新設定流速
②樣品超載--降低樣品量
③鍵合相流失--流動相PH值保持在3~7.5;檢查柱的方向
④流動相組成變化--防止流動相蒸發(fā)或沉淀
⑤溫度增加--柱恒溫
（三） 保留時間延長
①流速下降--管路泄漏,更換泵密封圈,排除泵內氣泡
②硅膠柱上活性點變化--用流動相改性劑,如加三乙胺,或采用堿至鈍化柱
③鍵合相流失--流動相PH值保持在3~7.5;檢查柱的方向
④流動相組成變化--防止流動相蒸發(fā)或沉淀
⑤溫度降低--柱恒溫
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