色譜分析法(Chromatography)簡稱色譜法或?qū)游龇ǎ且环N物理或物理化學(xué)分離分析方法,該法利用某一特定的色譜系統(tǒng)(薄層色譜、高效液相色譜或氣相色譜等系統(tǒng))進行混合物中各組分的分離分析,主要用于分析多組分樣品。
一、色譜法的分類
1、按兩相物理狀態(tài)分類
? 流動相:氣相色譜、液相色譜、超臨界流體色譜
? 固定相:氣-固、氣-液;液-固、液-液
2、按固定相的形式分類
? 柱色譜:填充柱色譜、毛細管柱色譜、微填充柱色譜、制備色譜
? 平面色譜:紙色譜、薄層色譜、高分子膜色譜
3、按分離機制分類
? 吸附色譜:吸附色譜是利用吸附劑對被分離物質(zhì)的吸附能力不同,用溶劑或氣體洗脫,以使組分分離。常用的吸附劑有氧化鋁、硅膠、聚酰胺等有吸附活性的物質(zhì)。
? 分配色譜:分配色譜是利用溶液中被分離物質(zhì)在兩相中分配系數(shù)不同,以使組分分離。其中一相為液體,涂布或使之鍵合在固體載體上,稱固定相;另一相為液體或氣體,稱流動相。常用的載體有硅膠、硅藻土、硅鎂型吸附劑與纖維素粉等。
? 離子交換色譜:利用被分離物質(zhì)在離子交換樹脂上的離子交換勢不同而使組分分離。常用的有不同強度的陽、陰離子交換樹脂,流動相一般為水或含有有機溶劑的緩沖液。
? 排阻色譜:又稱凝膠色譜或凝膠滲透色譜,是利用被分離物質(zhì)分子量大小的不同和在填料上滲透程度的不同,以使組分分離。常用的填料有分子篩、葡聚糖凝膠、微孔聚合物、微孔硅膠或玻璃珠等,可根據(jù)載體和試樣的性質(zhì),選用水或有機溶劑為流動相。
二、色譜法的優(yōu)點
分離效率高。幾十種甚至上百種性質(zhì)類似的化合物可在同一根色譜柱上得到分離,能解決許多其他分析方法無能為力的復(fù)雜樣品分析。
分析速度快。一般而言,色譜法可在幾分鐘至幾十分鐘的時間內(nèi)完成一個復(fù)雜樣品的分析。
檢測靈敏度高。隨著信號處理和檢測器制作技術(shù)的進步,不經(jīng)過預(yù)濃縮可以直接檢測10-9g級的微量物質(zhì)。如采用預(yù)濃縮技術(shù),檢測下限可以達到10-12g數(shù)量級。
樣品用量少。一次分析通常只需數(shù)納升至數(shù)微升的溶液樣品。
選擇性好。通過選擇合適的分離模式和檢測方法,可以只分離或檢測感興趣的部分物質(zhì)。
多組分同時分析。在很短的時間內(nèi)(20min左右),可以實現(xiàn)幾十種成分的同時分離與定量。
易于自動化。現(xiàn)在的色譜儀器已經(jīng)可以實現(xiàn)從進樣到數(shù)據(jù)處理的全自動化操作。
三、色譜法的缺點
定性能力較差。為克服這一缺點,已經(jīng)發(fā)展起來了色譜法與其他多種具有定性能力的分析技術(shù)的聯(lián)用。
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